克氏原螯虾,别名红螯虾和淡水小龙虾，是世界上最主要的淡水螯虾养殖种类，原产于北美洲，1929年由日本引入中国。随着其自然种群的扩展和人类的养殖活动，现已成为我国淡水虾类中的重要资源，广泛分布于我国东北、华北、西北、西南、华东、华中、华南的20多个省、自治区、直辖市及台湾地区。近年来，随着“虾稻综合种养技术”的普及与应用，小龙虾养殖发展迅猛，消费市场持续放大，产业链不断延伸，全国小龙虾养殖面积和产量持续快速增长。

羟基蛋氨酸螯合铜、锌、铁、锰是一种以必需氨基酸为配位体的新型有机微量元素，其具有产品安全、生物学利用率高、适口性好、产品性质稳定，对饲料维生素等营养素破坏少、水体溶失率低等优点，能有效补充利用蛋氨酸，促进水产动物生长、降低饵料系数、改善体色、提高免疫力和成活率等。

鉴于此，本试验拟在克氏原螯虾基础日粮中添加羟基蛋氨酸螯合铜、锌、铁、锰，探讨其对克氏原螯虾生长性能、非特异性免疫等的影响，旨为羟基蛋氨酸螯合有机微量元素在水产养殖生产中的应用提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验所用克氏原鳌虾来源于湖南湖鑫水产养殖科技有限公司，羟基蛋氨螯合有机微量元素和其他微量元素均由长沙兴嘉生物工程股份有限公司提供。 

1.2 试验设计

克氏原鳌虾购回后先于30m³水泥池中暂养2周。试验开始时，选择健康、规格和重量基本一致的克氏原螯虾（平均初体重7.50g左右）360尾，随机分为2个处理组，每个处理组6个重复，于80cm×60cm×75cm的水族箱中饲养，每个水族箱投放30尾虾。

1.3 试验日粮

试验日粮为定制小龙虾饲料，以进口鱼粉和豆粕为蛋白质源，大豆油作为脂肪源配制基础饲料（粗蛋白质:31.8%，粗脂肪:5.32%，赖氨酸:1.55%，粗纤维:9.57%，总磷:0.98%），1组纯无机组均按照正常水平添加以硫酸盐为主的无机微量元素，2组羟基蛋氨酸螯合物组则以低剂量的羟基蛋氨酸螯合铁、铜、锌、锰，其他微量元素添加量和剂型与1组一致。具体添加量见下表1。

▼ 表1  矿物质预混料配方

1.4 试验管理

克氏原螯虾在试验水族箱中驯化7d后投喂试验日粮，每天投喂两次(8:30、16:00)，日投饵量为虾体质量的3%-5%，上午投饵量为日投饵量的30%，下午为70%，并根据摄食和生长情况作适当调整，以每次投饲1.5h后无残饵为宜，水族箱水深15～20cm，放入树枝和易拉罐作为隐蔽物，增氧机24小时增氧，每天换水1/3～1/2（水源为水库水），用皮管虹吸出残饵和排泄物。试验为期40天。饲养期间水温为(26±4)℃。

1.5 采样与处理

1.5.1 生长性能

饲养试验结束后，禁食24h，将各水族箱中的克氏原螯虾称重并计数，统计投饵量，并计算增重率、饵料系数、成活率。

计算公式如下：

增重率（%）=[（末总重(g)-初总重(g)+死虾重(g)）/初总重(g)]×100

饵料系数=总投饲量(g)/(终总重(g)-初总重(g)+死虾重(g))

成活率（%）=（试验结束虾尾数/试验开始虾尾数）×100

1.5.2 血液生化指标的测定

从各组随机选取克氏原螯虾10尾，用滤纸吸干虾体水分，用1mL的一次性注射器从虾的头胸甲后部刺入心脏，抽取血液，放入离心管内，置于4℃冰箱中过夜，用冷冻离心机以5000r/min离心10min，取上清液放入冰箱(-20℃)中备用，用于溶菌酶、铜蓝蛋白、碱性磷酸酶和总蛋白的测定,方法为试剂盒法。

1.6 数据分析

试验数据均采用SPSS statistics16.0统计软件分析，用单因素方差分析(One-wayANOVA)中的Duncan氏多重比较法分析试验数据的差异显著性。试验数据用平均数±标准差表示。

2 试验结果与分析

2.1 羟基蛋氨酸螯合铜、锌、铁、锰对克氏原螯虾生长性能的影响

由表2可见，与1组（纯无机组）相比，2组（羟基蛋氨酸螯合物组）的增重率、饵料系数与成活率均有显著差异（P<0.05），其中，2组的增重率提高19.79%，成活率提高9.65%，饵料系数降低9.93%。

▼ 表2 羟基蛋氨酸螯合铜、锌、铁、锰对克氏原螯虾生长性能的影响

同列数字后不同字母表示差异显著（P<0.05）

2.2 羟基蛋氨酸螯合铜、锌、铁、锰对克氏原螯虾血液生化指标的影响

分析表3可知，2组（羟基蛋氨酸螯合物组）能显著提高克氏原螯虾铜蓝含量和溶菌酶活性（P<0.05），在一定程度上提高总蛋白浓度和碱性磷酸酶活性，但与1组（纯无机组）相比显著不差异（P>0.05）。

▼ 表3 羟基蛋氨酸螯合铜、锌、铁、锰对克氏原螯虾血清生化指标的影响

同列数字后不同字母表示差异显著（P<0.05）

3 讨论

氨基酸螯合物主要集中在畜禽方面的研究，水产动物应用研究较少，至今未见在克氏原螯虾上的应用研究。本试验研究结果表明，在克氏原螯虾基础日粮中添加羟基蛋氨酸螯合铜、锌、铁、锰能提高螯虾的增重率和成活率，降低饵料系数（P<0.05），而且表观上发现克氏原鳌虾体色好，活力强。与Kumar Katya等(2016年)以凡纳滨对虾为研究对象的试验结果一致。可能与羟基蛋氨螯合微量元素在吸收过程中，受植酸、钙等拮抗影响低，以氨基酸途径吸收，利用率高，以及其特殊的结构，在动物体内用具有更有效的激活消化酶等酶活性，促进营养物质吸收转化等有关。

螯虾体的血液指标能很好地反映虾体的代谢、营养状况以及疾病等,血液成份的变化被广泛用来评价虾体的健康状况、营养状况以及对环境的适应状况。血清蛋白浓度反映虾体的营养和代谢状态，也间接反映机体的免疫水平。本试验中，与纯无机组相比，羟基蛋氨酸螯合物组在一定程度上提高了虾体血清总蛋白含量（P<0.05）,说明饲料中添加羟基蛋氨酸螯合铜、锌、铁、锰有利于增加虾体蛋白质的合成，促进生长。

铜蓝蛋白是血清中的含铜蛋白质,清除氧自由基和超氧阴离子,有着抗氧化剂的作用，并具有氧化酶活性。溶菌酶可以溶解细菌胞壁中的粘多糖，水解革兰氏阳性菌细胞壁中的乙酰氨基多糖，破坏和消除侵入虾体的异物，对致病菌有抑制作用，是生物体内最重要的非特异性免疫因子之一。碱性磷酸酶是甲壳动物机体防御能力的重要组成部分，也是吞噬细胞杀菌的物质基础，有助于提高甲壳动物的抗病力。本试验中，羟基蛋氨酸螯合物组能显著提高克氏原螯虾铜蓝含量和溶菌酶活性（P<0.05），提高碱性磷酸酶活性，增强鳌虾的抗病力，与添加羟基蛋氨酸螯合物组克氏原螯虾成活率比无机微量元素组高9.65%结果一致。

4 结论

在克氏原螯虾饲料中，相比无机微量元素，添加羟基蛋氨酸螯合铜、锌、铁、锰可显著提升克氏原螯虾的生产性能，降低饵料系数，及显著提高克氏原螯虾铜蓝含量和溶菌酶活性，改善血清总蛋白浓度和碱性磷酸酶活性，增强其免疫水平和抗病力，提高成活率。